Page 128 - INATEL - Revista Fetin 39ª- Vol8

Mini

Termociclador

Equipe: Beatriz S. de Mendonça | Giovanna Saldanha Zordan
Orientador: Francisco Eduardo de Carvalho Costa

O termociclador é um aparelho usado para amplificar segmentos de DNA via PCR (Reação
em Cadeia da Polimerase).
Além de ser um aparelho grande que não pode ser facilmente transportado, possui alto cus-
to no mercado. Considerando a atual situação do mundo, onde a ferramenta é o principal
meio de análise para o diagnóstico da presença do coronavírus SARS-CoV-2 no organismo,
propõe-se a produção de um aparelho simplificado que possa ser facilmente transportado
e com custos reduzidos, tornando-o mais acessível com resultados igualmente precisos e
com a mesma uniformidade em todo o processo.

projeto

Em um bloco de metal são colocados os tubos PCR, anexado a um aquecedor responsável
pela desnaturação das amostras. Abaixo disso há componentes responsáveis pelo resfria-
mento das mesmas. Serão utilizados trocadores de calor Peltier.
A repetição dos processos é controlada por uma placa do circuito conectada aos sensores de
temperatura. Nos tubos do PCR, são inseridos todos os reagentes (segmento de DNA, enzima
polimerase, nucleotídeos, primers, juntamente dos cofatores de que a enzima precisa).
Para programar o Mini Termociclador basta conectar um cabo USB a um celular ou tablet e
abrir o aplicativo responsável.
Ajustando a temperatura desejada e a duração pra cada etapa, especifique o número de
ciclos, salve seu programa e o atualize para a máquina PCR.

funcionamento

Primeiramente, deve-se abrir o aplicativo responsável atra- A enzima DNA-polimerase adiciona as bases complemen-
vés de um celular ou tablet, ajustar a temperatura, a dura- tares, formando uma nova fita e ocorre novamente a dupli-
ção de cada etapa e o número de ciclos desejados. cação, em aproximadamente 72ºC.
O aquecedor será responsável pela desnaturação do DNA O ciclo é reiniciado de 20 a 30 vezes através da placa do
a cerca de 95ºC por cerca de 30 segundos. A dupla fita, circuito conectada aos sensores de temperatura (aquece-
então, será desnaturada tornando-se uma fita única. dor e resfriador), e os produtos do primeiro ciclo de repli-
Em seguida, uma fita de DNA específica para o gene pedi- cação serão desnaturados, com os produtos de cada ciclo
do, os primers, complementam a fita oposta da sequência servindo como DNA-molde para o próximo.
de DNA a ser amplificada, ocorrendo a uma temperatura
de 60°C.

Instituto Nacional de Telecomunicações - Inatel